豬偽狂犬病診斷方法與鑒別技巧 您必須了解的檢測(cè)步驟

本病根據(jù)疾病的臨床癥狀，結(jié)合流行病學(xué)，可做出初步診斷，確診必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。同時(shí)要注意與豬細(xì)小病毒、流行性乙型腦炎病毒等引起的母豬繁殖障礙相區(qū)別。

本文為大家介紹豬偽狂犬病的診斷與鑒別方法，供參考。

一、病毒分離鑒定

病毒的分離是診斷偽狂犬病的可靠方法。患病動(dòng)物的多種病料組織如腦、心、肝、脾、肺、腎、扁桃體等均可用于病毒的分離，但以腦組織和扁桃體最為理想。

另外，鼻咽分泌物也可用于病毒的分離。病料處理后可直接接種敏感細(xì)胞，如豬腎傳代細(xì)胞(pk一l5和ibrs一2)、雞胚成纖維細(xì)胞(cef)，在接種后24～72小時(shí)內(nèi)可出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變。

分離到病毒后再用標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清做中和試驗(yàn)以確診本病。

二、切片檢查

組織切片熒光抗體檢測(cè)取患病動(dòng)物的病料如腦或扁桃體的壓片或冰凍切片，用直接免疫熒光檢查。

其優(yōu)點(diǎn)是快速，在幾小時(shí)內(nèi)即可獲得可靠結(jié)果，對(duì)于新生仔豬，其敏感性與病毒分離相當(dāng)，但對(duì)于育肥豬與成年豬，該法則不如病毒分離敏感。

三、pcr檢測(cè)

pcr檢測(cè)豬偽狂犬病病毒利用pcr可從患病動(dòng)物的分泌物如鼻咽拭子或組織病料中擴(kuò)增豬偽狂犬病病毒的基因，從而對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行確診。

pcr與病毒分離鑒定相比，具有快速、敏感、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，能同時(shí)檢測(cè)大批量的樣品，并且能進(jìn)行活體檢測(cè)，適合于臨診診斷。

四、血清學(xué)檢查

血清學(xué)診斷多種血清學(xué)方法可用于偽狂犬病的診斷，應(yīng)用最廣泛的有中和試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)及間接免疫熒光等。

其中血清中和試驗(yàn)的特異性、敏感性都是最好的，并且被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(oie)列為法定的診斷方法。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)同樣具有特異性強(qiáng)、敏感性高的特點(diǎn)，3～4h內(nèi)可得出試驗(yàn)結(jié)果，并可同時(shí)檢測(cè)大批量樣品，廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。

另外，近幾年來(lái)，乳膠凝集試驗(yàn)以其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)也在臨診上廣泛應(yīng)用，操作極其簡(jiǎn)便，幾分鐘之內(nèi)便可得出試驗(yàn)結(jié)果。

五、鑒別診斷

鑒別診斷豬偽狂犬病病毒鑒別診斷方法是在使用基因標(biāo)志疫苗的基礎(chǔ)上應(yīng)用的一類診斷方法。由于prv中存在多個(gè)非必需糖蛋白基因，缺失這些基因的病毒突變株不能產(chǎn)生被缺失基因所編碼的糖蛋白，但又不影響病毒在細(xì)胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失標(biāo)志疫苗注射動(dòng)物后，動(dòng)物不能產(chǎn)生針對(duì)缺失蛋白的抗體。因此，可通過(guò)血清學(xué)方法將自然感染野毒的血清學(xué)陽(yáng)性豬與注苗豬區(qū)分開(kāi)來(lái)。

目前，缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要為ge和gg基因，也有缺失gc、gb基因的。針對(duì)缺失的糖蛋白已利用大腸桿菌或酵母等表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物建立了相應(yīng)的鑒別診斷方法：ge一elisa(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))、gg一elisa、gc一elisa、gb一elisa以及 ge一lat(乳膠凝集試驗(yàn))、gg、lat等，實(shí)驗(yàn)證實(shí)這些方法的特異性強(qiáng)、敏感性高，可用于臨診檢測(cè)，同時(shí)乳膠凝集還具有簡(jiǎn)單、快速的特點(diǎn)。目前，在我國(guó)已有g(shù)e一elisa、gg一elisa和ge一lat、gg一lat問(wèn)世。